myBaits Expert 16S-Hybpanel
鉴别样本中微生物种类并定义微生物群落内关系,在人类健康、环境调查、动物保护和农业改良等方面均有重要的应用。16S rRNA测序,经常用于鉴定和分析样本的微生物群落组成。
myBaits Expert 16S-HybPanel 运用杂交捕获技术,可以富集整个 16S基因,而不仅仅是一两个高变区(hypervariable regions)。与 16S扩增子测序相比,具有更好的分类分辨率和更少的偏差。此试剂盒结合宏基因组方法,还可以有效鉴别全新表型的稀有微生物,并降低单个样本的测序深度。将 16S-Hyb rRNA 基因富集测序与低覆盖度鸟枪法测序相结合,可以更高效地鉴别宏基因组样本中的微生物种群,比单独的鸟枪法测序成本低,并且比 16S 扩增子测序更准确。
myBaits Expert 16S-HybPanel 为完整试剂盒,包含各种 blockers 、杂交探针和验证过的操作流程。此外,我们也提供全流程的技术服务。
产品特点
快捷 – 可直接使用鸟枪法的 NGS文库进行捕获测序
低成本 – 可用较少的测序量鉴别宏基因组样本中的稀有类群
低偏差 – 有效避免 16S 扩增子测序引入的扩增偏差
高分辨率 – 检测全部保守和高变区域
开放平台 – 与各种 NGS 文库平台兼容,包括长读长测序
组分齐全 – 试剂盒包括 NGS 文库捕获所需的所有试剂
产品应用
• 宏基因组学
• 环境采样
• 古 DNA
• 微生物组分析
• 长读长测序
与扩增子测序法相比,16S-Hyb 准确性更高
在人造模拟群落、⼩鼠粪便和⼤鼠结肠的样本中,比较 myBaits 16S 捕获测序、16S 扩增⼦测序和⻦枪法宏基因组测序法。未经富集的宏基因组测序(鸟枪法)收集到的数据,16S 约占总数据量的 0.1-0.2%;与之相比,myBaits 16S-Hyb 捕获测序中,60-70% reads 可以比对到 16S 区域,在模拟群落样本中富集了 350 倍,⼩鼠粪便和⼤鼠结肠样本中富集了 450 倍。myBaits 16S-Hyb 捕获测序与扩增子测序法相比,无论用 MiSeq 或 HiSeq 测序,样本富集图谱更接近于模拟群落组成和鸟枪法图谱。
图1 模拟样本类群分析
样本“BEI Resources模拟群落”包含已知含量的细菌群(第5列),分别使⽤16S扩增⼦测序- MiSeq PE 300(第1列)、myBaits16S-HybMiSeq PE 300(第2列)、myBaits 16S-Hyb-HiSeq PE150(第3列)和⻦枪法宏基因组测序-HiSeq PE 150(第4列)。 杂交捕获和鸟枪法测序的 reads 过滤后,使⽤ bbmap比对到GreenGenes 数据库分析。扩增子测序的 reads 用 Dada2 pipeline处理后比对到GreenGenes 数据库。
图2. 16S 扩增子测序 vs 16S Hyb vs鸟枪法
从⼩鼠粪便和⼤鼠结肠中提取的DNA样本,分别使用 16S扩增⼦测序- MiSeq PE 300(第1,5 列),myBaits 16S-Hyb- MiSeq PE300(第 2,6列),myBaits 16S-Hyb-HiSeq PE150(第3,7列)和⻦枪法宏基 因组测序-HiSeq PE 150(第 4,8列)进行分析。 杂交捕获和鸟枪法测序的 reads 过滤后,使⽤bbmap 比对到 GreenGenes 数据库分析。扩增子测序的 reads 用 Dada2 pipeline处理后比对到 GreenGenes 数据库。
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