过度染色
1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度组织粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特异性结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。
2. 处理过程中抗原破坏。
3. 固定不当。
4. 用含叠氮钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫试剂前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. 过氧0化氢的破坏作用。
1.运输、储存和有效期
常温运输(勿超过 30℃),2-8℃储存。正常储存条件下自生产之日起有效期 2 年。
2.操作方法
将标本与本产品室温孵育 10 分钟后,用 Tris 或 PBS 冲洗。
3.注意事项
内源性碱性活性在很多细胞和组织中很强,如膀胱上皮细胞、卵0巢固有层、shen脏和唾液腺。小0肠碱性磷酸酶常见于在小0肠上皮细胞的刷状缘;人0胎0盘的碱性磷酸酶常见于胎0盘合体滋养层细胞的微绒毛;在细胞涂片中,碱性磷酸酶见于嗜中性分割细胞,嗜中性带细胞,和嗜中性晚幼粒细胞。碱性磷酸酶也见于慢性和急性粒细胞白0血病以及某些嗜中性粒细胞白0血病反应。
加生物素化抗0体
1. 去掉缓冲液,擦掉切片周围的液体。
2. 加生物素化抗0体,完全覆盖切片。
3. 室温孵育 30min。
4. 用洗涤液洗去抗0体,sp2/0(细胞),用洗涤液润洗 5min。
加亲合素-HRP
1. 去掉缓冲液,擦掉切片周围的液体。
2. 加亲合素-HRP,完全覆盖切片。
3. 室温孵育 30min。
4. 用洗涤缓冲液洗去亲合素-HRP,用洗涤缓冲液润洗 5min。
显色
1. 加显色液(自备)显色。
可能出现的问题和解决方法
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