抗原制备及纯化
抗原制备: 参照文献[10]制备 MRJ 抗原。复苏pET28a-mrj 转 Rosetta 菌0种 接 种 于 具 Kana抗 性 的10 mL液体培养基中的,37 ℃ 培养过夜,次日以 1∶ 50转瓶进行扩大培养,当菌液 OD600达 0. 6时加入浓度为 5 mmol /L 的 IPTG,37 ℃ 诱导 8 h超声碎裂后进行考马斯亮蓝染色检验,有目的蛋白的大量表达。抗原大量制备及纯化: 以 5 × 10 -4 mol /L浓度的IPTG,37 ℃ 条件下大量诱导( 200 mL 菌液) 8 h 后收集样品,CPG佐剂,超声裂解后将所得 MRJ 蛋白过Ni-IDA 凝胶柱亲和纯化,考马斯亮蓝染色后检测目的蛋白纯度高于 90% ,可用于单克0隆抗0体制备动物免0疫的抗原。
免0疫佐剂简称佐剂,即非特异性免0疫增0生剂,指那 些同抗原一起或预先注入机体内能增强机体 对抗原的免0疫应答能力或改变免0疫应答类型的辅助物质。佐剂可以具有免0疫原性,也可无免0疫原性。佐剂种类很多,目前尚无统一的分类方法,应用zui多的是弗氏佐剂和细胞0因子佐剂。佐剂的免0疫生物学作用是增强免0疫原性、增强抗0体的滴度、改变抗0体产生的类型、引起或增强迟发超敏反应,但佐剂的作用机制尚未完全明了,不同佐剂作用的机 制也不尽相同。
DOI:搭建信息资源的桥梁
数字对象唯0一标识(digital objectidentifier,DOI)被形象地称为“英特网上的条形码”,如同贴了标签的商品,数字对象一旦被分配一个DOI号,无论它处于英特网上的任何位置,通过DOI都能够找到它,因此解决了传统网络标识系统的不稳定性,实现了更有效的网络链接。DOI技术即将成为国际上数字出版界构建数字信息交换平台的首要选择。
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