作用机制:
佐剂增强免0疫应答的机制可能有:①改变抗原物理性状,延长抗原在机体内的存在时间和保持对免0疫系统的持续激0活作用,佐剂中的矿物油成分主要起缓释作用,有利于抗原在体内缓慢释放,延缓抗原在体内降解,从而更有效地刺激免0疫系统。②使抗原易被巨噬细胞吞噬,刺激单核巨噬细胞系统,增强其对抗原的处理和呈递抗原的能力。③促进淋巴细胞的增殖、分化,从而扩大和增强机体的免0疫应答的效应。
杂交瘤分泌McAb的稳定性
杂交瘤细胞体外连续传代培养了3个月,培养上清经ELISA检测能持续分泌抗AFP—McAb,杂交细胞经液氮冻存一年后细胞复苏培养生长良好,仍能保持分泌抗AFP—McAb的能力。
杂交瘤细胞染色体计数
杂交瘤细胞染色体总数为96~104条,SP2/0骨0髓瘤细胞染色体总数为65条,Balb/c小鼠脾细胞染色体总数为40条,符合杂交瘤特征。
动物免0疫
使用 作为免0疫佐剂,对小鼠腿部肌肉注射免0疫,MRJ 重组蛋白( 1 μg /mL)与免0疫佐剂各200 μL 混匀免0疫 6-8 周龄 BALB / c 小鼠 4 只,无缝kelong(试剂盒),每只注射 100μL。初次免0疫后第 21 天同样的方法进行第二次免0疫,第 35 天尾静脉取少量血做效价检测,间接 ELISA 检测效价滴度高于 1∶ 8 000 则进行冲击免0疫,冲击免0疫直接以不加佐剂的 MRJ 蛋白对小鼠冲击免0疫一次,每只 20 μg。冲击免0疫后 96h 内取脾0脏细胞做细胞融合。
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