结 果
一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较
对两组试验动物在完成了基础免0疫后,尾静脉采集少量血液,分离血0清,快速佐剂,进行间接ELISA测定抗0体效价,检测结果见图1。由图中数据可知,新的改良免0疫方法,在第二次免0疫后,抗0体效价即达到1:104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows13.0版)进行t检验,统计结果差异极显著(P(0.001)。
二、两种免0疫方式小鼠融合率比较
在细胞融合后约7~10d可见孔内杂交瘤细胞生长,当细胞融合成片达孔底面积的35%~50%时,用ELISA检测特异性抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短,但获得的抗0体效价更高。
细胞融合
取已免0疫小鼠的脾0脏用不完全培养基制成细胞悬液,计数。收集选择生长状态良好的 SP2 /0骨0髓瘤细胞,制成细胞悬液,计数。将 SP2 /0 骨0髓瘤细胞与免0疫小鼠的脾细胞以 1∶ 10 在 50% 的 PEG1500作用下融合[8]。加 HAT 选择培养基重悬混匀后滴入到铺有饲养层细胞的 3 块 96 孔细胞培养板。放入37 ℃ ,含 5% 的CO2 培养箱中培养。
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