石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与贴片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日,但标本可以长期保存使用,为性显微玻片标本。应根据要求选取材料来源及部位。例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖,细胞分裂快又便于切取;猪的肝小叶边界清晰明确;耳蜗以豚鼠的内耳易于定位和剥离。材料必须新鲜,搁置时间过久则产生蛋白质分解变性,导致细胞自溶及细菌的滋生,而不能反映组织时的形态结构。
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家专业从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士领衔创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向全国提供优质的生物技术服务。
教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会和产生组织,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织,半薄切片服务技术,而能清晰辨认其形态结构。
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脱水:样品置于样品篮中,30%,50%,70%,85%,95%,酒精梯度脱水。
透明:样本用纯酒精和二1:1比例混合液处理2-3h,转入纯二中,每次1h,共处理2次。除去样品中的酒精,使材料透明。
浸蜡:石蜡慢慢溶于透明剂中,然后完全取代透明剂进入材料中,将上述已透明好的材料换入新的二中,然后加入等体积的碎蜡,置于4度冰箱中,备切片用。
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