产品简介
本公司生产的大肠杆菌DB3.1细胞含有gyrA462基因,对λ噬菌体的ccdB基因产物的毒性具有抵抗作用,特别适用于转化和扩增包含ccdB基因的质粒载体。使用pUC18质粒检测,转化效率可达107cfu/μg DNA.,-80℃ 保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用,降低了实验的成本。质量稳定,使用方便,。
产品组成
组分 CC96182-01 CC96182-02 CC96182-03
DB3.1感受态细胞 | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL | 定制 |
基因型:F-gyrA462 endA1 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44ara-14galK2 lacY1 proA2 rpsL20(SmR) xyl-5 λ- leu mtl1
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
产品特性
- DB3.1感受态细胞具有链霉素抗性
质量控制
无外源质粒DNA残留;
化学法转化效率≥107cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化DNA加入到100μL感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30min;
3. 将离心管置于42℃水浴锅中,不要晃动,热激90s后,立刻置于冰水浴中静置2-3min;
4. 向离心管中加入900μLLB或SOC培养基(室温或37℃预热),然后置于37℃摇床复壮45min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于37℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10;
3. 加入待转化DNA后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保Zui高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。