产品简介
本品为使用大肠杆菌DH10B菌株制备的高效化学感受态细胞，转化效率可达108cfu/μg DNA，被广泛用于质粒转化、基因克隆等；可以使用蓝白斑筛选。
产品组成
组分 | CC96101-01 | CC96101-02 | CC96101-03 |
DH10B感受态细胞 | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL | 定制 |
基因型：F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara, leu)7697 galE15 galKλ- rpsL nupG
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
产品特性
-来源于MC1061菌株，可用于基因克隆等；
-rpsL突变赋予DH10B菌株链霉素抗性；
-蓝白斑筛选时，需在平板上预先涂布IPTG和X-gal；
-mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA；
-由于recA1和endA1的突变，因此该菌株的重组率较低，有利于插入DNA的稳定，故常用于克隆质粒的保存和高纯度质粒DNA的提取。
质量控制
无外源质粒DNA残留；
化学法转化效率≥108cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 将待转化DNA加入到100μL感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30min；
3. 将离心管置于42℃水浴锅中，不要晃动，热激90s后，立刻置于冰水浴中静置2-3min；
4. 向离心管中加入900μL LB或SOC培养基（室温或37℃预热），然后置于37℃摇床复壮45min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于37℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10；
3. 加入待转化DNA后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保Zui高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
