产品简介
本品为使用大肠杆菌BL21(DE3)菌株制备的高效化学感受态细胞,转化效率超过107cfu/μg DNA,可以用于pET等系列质粒的蛋白高效表达。
产品组成
组分 | CC96107-01 | CC96107-02 | CC96107-03 |
BL21(DE3)感受态细胞 | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL | 定制 |
基因型:F- ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm(DE3)
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
产品特性
-BL21(DE3)品系,T7RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区域被整合于BL21的染色体上;
-是以T7RNA聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主,适合于非病毒蛋白重组表达。
质量控制
无外源质粒DNA残留;
化学法转化效率≥107cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化DNA加入到100μL感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30min;
3. 将离心管置于42℃水浴锅中,不要晃动,热激90s后,立刻置于冰水浴中静置2-3min;
4. 向离心管中加入900μL LB或SOC培养基(室温或37℃预热),然后置于37℃摇床复壮45min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于37℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10;
3. 加入待转化DNA后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保Zui高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。