产品简介
Stbl3菌株来源于大肠杆菌HB101菌株,是慢病毒载体系统推荐使用的菌株。基因组带有重组酶recA13突变,可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但由于菌株不含核酸酶endA1突变,因此体内核酸酶含量较高,在提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液进行处理,否则抽提出的质粒很不稳定,易降解。此菌株具有链霉素抗性,不存在lacIqZΔM15,不可用于蓝/白斑筛选实验。经pUC18转化检测,Stbl3感受态细胞的效率可达108cfu/μg DNA。
产品组成
组分 | CC96134-01 | CC96134-02 | CC96134-03 |
Stbl3化学感受态细胞 | 10 × 100μL | 100 × 100 μL | 定制 |
基因型:F- mcrB mrrhsdS20(rB- mB-)recA13 supE44 ara-14 galK2lacY1 proA2 rpsL20 (StrR)xyl-5 λ- leu mtl-1endA1+
存储条件
-80℃保存;请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
产品特性
-属于大肠杆菌K株系列,主要用于目标基因的克隆和质粒的保存;不可用于以T7RNA聚合酶为表达系统的蛋白表达;
-该菌株适合克隆不稳定插入片段,甲基化的基因组序列,以及慢病毒载体的构建。
质量控制
无外源质粒DNA残留;
化学法转化效率≥108cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1.将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰浴中融化;
2.将待转化DNA加入到100μL感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30min;
3.将离心管置于42℃水浴锅中,不要晃动,热激90s后,立刻置于冰浴中静置2-3min;
4.向离心管中加入900μL LB或SOC培养基(室温或37℃预热),然后置于37℃摇床复壮45min;
5.取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于37℃培养箱培养过夜。
注意事项
1.感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2.加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10;
3.加入待转化DNA后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4.为确保Zui高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。